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5'... G Am6/T C ...3' 3'... C T/Am6 G ...5' 快速內切酶，可在5~15 min內完成反應 反應溫度為37℃ 受EcoBI甲基化影響，序列可能重疊，剪切可能受影響 失活條件為80℃溫育20 min 3 h溫育未表現星號活性，延時酶切可能出現星號活性 同裂酶：MalI