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5'... G/T C G A C ...3' 3'... C A G C T/G ...5' 快速內切酶，可在5~15 min內完成反應 反應溫度為37℃ 受CpG甲基化影響，序列完全重疊，剪切阻斷 失活條件為80℃溫育20 min 3 h溫育未表現星號活性，延時酶切可能出現星號活性