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5'... C C T C (N)7/...3' 3'... G G A G (N)6/...5' 快速內切酶，可在5~15 min內完成反應 反應溫度為37℃ 受EcoBI甲基化影響，序列可能重疊，剪切阻斷 失活條件為80℃溫育20 min 3 h溫育未表現星號活性，延時酶切可能出現星號活性